Характеристика костномозгового кроветворения

У эмбриона человека костный мозг закладывается к концу 3-го месяца. В костном мозге имеются две группы клеток: клетки ретикулярной стромы, составляющие меньшинство, и клетки кроветворной ткани (паренхимы) костного мозга с их производными - зрелыми клетками крови.

К клеткам ретикулярной стромы относят фибробласты, остеобласты, жировые клетки, эндотелиальные клетки. К клеткам паренхимы костного мозга - клетки гранулоцитарного, моноцитарного, эритроидного, мегакариоцитарного и лимфоидного рядов. У новорожденных преобладает кроветворный костный мозг, к 30 годам соотношение жирового и кроветворного костного мозга выравнивается до соотношения 50 %: 50 % и в возрасте 70 лет соотношение становится 70 %: 30 %. Кроветворный костный мозг у здоровых людей содержится в костях черепа и тазе, грудине, ребрах, лопатках, позвоночнике, проксимальных отделах длинных костей.

Кроветворение - это сложный, многостадийный процесс клеточных делений и дифференцировок, в результате которого образуются зрелые, функционально полноценные клетки крови.

Современная схема кроветворения описывает последовательность дифференцировок в кроветворной ткани, начиная от исходных клеточных звеньев и заканчивая не способными к пролиферации формами. Основным кроветворным органом является костный мозг.

Выделяют 5 классов клеток системы крови (А. И. Воробьев, Г. И. Козинец).

I класс (стволовые клетки). Эти клетки обладают способностью к дифференцировке и самоподдержанию. Класс стволовых клеток является гетерогенной клеточной популяцией, в которую входят разные по пролиферативному потенциалу клетки-предшественники. Считается, что в процесс дифференцировки стволовые клетки вступают стохастически, случайно. Для самоподдержания родоначальных клеток необходимо кроветворное микроокружение.

II класс. Ближайшими потомками родоначальных клеток являются полипотентные и бипотентные (коммутированные) клетки-предшественники, обладающие более низким дифференцировочным потенциалом, чем стволовые. Полипотентные клетки способны дифференцироваться в нескольких направлениях. Например, колониеобразующая мегакариоцито-эритроцитарная единица (КОЕ-ГЭММ-Т) дифференцируется в направлениях гранулопоэза, эритропоэза, мегакариоцитопоэза, макрофагопоэза и Т-лимфопоэза. Регуляция пролиферации и дифференциации на этом этапе кроветворения осуществляется гемопоэтическими факторами роста или колониестимулирующими факторами.

III класс - унипотентные клетки-предшественницы, дифференцирующиеся только в определенном направлении, например моноцитарного или какого-либо другого ряда. Морфологически клетки первых трех классов неразличимы.

IV и V классы - это классы морфологически распознаваемых клеток - бластных, созревающих и зрелых.

В нейтрофильном гранулоцитарном ряду созревание клеток связано с их делением. Миелобласты и промиелоциты делятся по одному разу, миелоциты - два раза. Второе деление миелоцита является завершающим, после чего клетки созревают без деления, последовательно превращаясь в метамиелоцит, палочкоядерный и сегментоядерный гранулоцит. Зрелые моноциты, в отличие от клеток гранулоцитарного ряда, способны к делению и могут превращаться в макрофаги. Все клетки эритроидного ряда, за исключением оксифильных нормоцитов, делятся, дифференцируясь. Оксифильные нормоциты превращаются в ретикулоциты в результате «выталкивания» ядра. Процесс кроветворения регулируется гемопоэтическими факторами роста или колониестимулирующими факторами (КСФ).

Приобретение коммитированности сопровождается появлением на поверхности клетки рецепторов, отвечающих на специфические сигналы различных регуляторов кроветворения. Соединение КСФ со специфическим рецептором на поверхности клетки вызывает сигнал, побуждающий клетку к дальнейшей дифференцировке по избранному пути до окончательной специализации. Помимо стимуляторов гемопоэза, существует система ингибиторов, участвующих в регуляции кроветворения.

Пункция костного мозга

Исследование костного мозга играет важную роль в диагностике различных заболеваний кроветворной системы, когда по клинической симптоматике и картине периферической крови установить природу патологического процесса не удается. Изучение характера костномозгового кроветворения, определение его функционального состояния и перестройки помогают разобраться в сложных диагностических ситуациях.

В настоящее время пункция грудины выполняется иглой Кассирского с предохранительным щитком. Щиток может быть установлен на любом расстоянии от грудины в зависимости от конституции и упитанности пациента. Вместо грудины можно пунктировать гребень подвздошной кости, а у детей - пяточную кость.

Пункцию грудины производят на уровне третьего-четвертого межреберья в области тела грудины или пунктируют рукоятку грудины. Анестезия 1-2 %-ным раствором новокаина в количестве 2-4 мл проводится послойно: кожа, подкожная клетчатка, надкостница. Время анестезии - 5-7 мин.

Иглу вводят быстрым движением строго по средней линии в костномозговой канал - при прохождении иглы через стенку грудины ощущается хруст. После извлечения мандрена на иглу насаживают шприц емкостью 10-20 мл, производят аспирацию костного мозга и выдувают его на парафинированное часовое стекло. Во избежание большой примеси крови в шприц целесообразно набирать как можно меньше костного мозга - 0,1-0,2 мл.

Из пунктата костного мозга готовят мазки для подсчета миелограммы - количества миелокариоцитов, мегакариоцитов, ретикулоцитов и других клеток. Взятие костного мозга и приготовление мазков надо производить быстро, так как костный мозг сворачивается быстрее, чем периферическая кровь, и клетки становится невозможно дифференцировать. Для замедления свертывания пунктата костного мозга можно предварительно нанести на

часовое стекло тонкий слой порошкообразного цитрата натрия.

В некоторых случаях материал получить не удается, несмотря на повторные насасывания шприцем. Причинами являются:

1) неправильное проведение пункции - плохо пригнан шприц и засасывается воздух, отверстие иглы закупорено кусочком кости или кожи, острие иглы не находится в костномозговом канале или упирается в заднюю пластинку кости;

2) гипоклеточный костномозговой пунктат - при постлучевой аплазии кроветворения, апластической анемии, идиопатическом миелофиброзе.

Нормальные величины

Общее количество ядерных элементов колеблется в широких пределах, очевидно, вследствие неодинакового состава костномозговой ткани в различных участках и примеси крови к пунктату.

У здоровых людей количество костномозговых клеток составляет 42-195 х 103 (А. И. Воробьев, 1985 г.), 80-150 х 103 (В. А. Бейер, 1967 г.) в 1 мкл.

Представленные нормативы имеют вероятность 86,6 %, т. е. показатели могут выходить за их пределы у 13,4 % здоровых людей.

Клиническое значение

Количество миелокариоцитов дает ориентировочное представление о клеточности костного мозга.

Повышение клеточности костного мозга имеет место у новорожденных, при острых и хронических лейкозах, истинной полицитемии, МДС, лейкемоидных реакциях, обусловленных инфекционными заболеваниями или злокачественными новообразованиями. Умеренное увеличение клеточности наблюдается после кровопотери, при гемолитических и В12-дефицитной анемии.

Уменьшение количества миелокариоцитов отмечено при старении, при одном из вариантов МДС - рефрактерной анемии, врожденной гипоплазии кроветворения (синдром Фанкони); при аплазии кроветворения в результате миелотоксического воздействия лекарственных препаратов (цитостатиков, анальгетиков, нестероидных противовоспалительных препаратов, антибиотиков, сульфаниламидных препаратов); при хронической интоксикации бензолом, воздействии ионизирующей радиации при метастазировании злокачественных новообразований в костный мозг, апластической анемии или миелофиброзе. Умеренное снижение количества ядерных клеток может быть при инфекционных заболеваниях, парциальной ночной гемоглобинурии.

Подсчет мегакариоцитов

Подсчет количества мегакариоцитов можно производить различными способами.

Подсчитывают число клеток в счетной камере Фукса - Розенталя. Количество мегакариоцитов определяют в 2-3 камерах и вычисляют среднее.

В мазках пунктата костного мозга при выведении миелограммы (подсчет не менее 500 клеток) отмечают процент мегакариоцитов. В норме должно быть от 5 до 13 мегакариоцитов в 250 полях зрения при просмотре мазков пунктата по В. А. Бейеру (1967 г.) или 5-12 на 250 полей зрения по Г. А. Алексееву (1959 г.).

Количество мегакариоцитов можно оценить ориентировочно, просматривая под малым увеличением микроскопа окрашенные мазки пунктата костного мозга. Мазок лучше покрыть тонким слоем иммерсионного масла, тогда мегакариоциты выглядят рельефнее. Количество мегакариоцитов оценивают по отношению к количеству всех ядерных клеток костного мозга.

Мегакариоциты - гигантские клетки костного мозга, они в 15-20 раз крупнее лейкоцитов, имеют диаметр 30-70 мкм, отчетливо видны под малым увеличением микроскопа, имеют интенсивно-фиолетовое многолопастное ядро, широкую зону цитоплазмы с зернистостью, в мазках располагаются неравномерно, сосредоточиваясь по краям препарата и в конце мазка. Отношение числа мегакариоцитов к общему количеству миелокариоцитов составляет менее 1 % (В. А. Бейер, 1967 г.), 0,04-0,4 % (И. А. Кассирский, 1948 г.); 0,1-0,2 % (Е. А. Кост, 1975 г.).

Все эти методы не являются достаточно точными. Наиболее достоверные сведения о количестве мегакариоцитов дает подсчет в срезе костного мозга, полученного при трепанобиопсии.

У здоровых людей количество мегакариоцитов составляет 63 ± 10 в 1 мкл. У детей в возрасте 5 месяцев - 3,5 года количество мегакариоцитов выше, чем у взрослых (116 ± 10,8 в 1 мкл пунктата).

Клиническое значение

Резкое увеличение количества мегакариоцитов в костном мозге является ранним признаком хронических миелопролиферативных заболеваний, особенно истинной полицитемии, а также хронического миелофиброза и миелолейкоза. Мегакариоцитоз костного мозга характерен также для идиопатической тромбоцитопенической пурпуры, иммунных тромбоцитопений, эссенциальной тромбоцитемии, может наблюдаться после кровопотери, при злокачественных новообразованиях, гигантских гемангиомах, циррозе печени с синдромом гиперспленизма.

Уменьшение числа мегакариоцитов характерно для апластической анемии, системных гиперпластических процессов (острых лейкозов, хронических лейкозов в терминальной стадии, лимфопролиферативных заболеваний), неходжкинских лимфом с поражением костного мозга, метастазов злокачественных опухолей в костный мозг.

Мегакариоциты - гигантские клетки костного мозга - являются родоначальными клетками тромбоцитопоэза. Не­смотря на то, что мегакариоциты идентифицированы как костномозговые "предшественники" тромбоцитов еще в на­
чале нынешнего столетия, механизмы развития и регуляции этих клеток еще полностью не раскрыты.

Мегакариобласты обнаруживают в желточном мешке на 5-й неделе эмбрионального развития. Мегакариоциты встре­чаются в сосудах на 8-й неделе, а макротромбоциты обна­руживают в крови на 16-й и 21-й неделе эмбриогенеза.

Мегакариоциты развиваются из плюрипотентной гемопо- этической стволовой клетки посредством комплекса процессов: 1) коммитации гемопоэтического предшествен­ника на путь мегакариоцитарной дифференцировки; 2) мито­тической амплификации клеток-предшественников мегака- риоцитов; 3) эндомитотического деления ядра, приводящего к возрастанию плоидности; 4) роста цитоплазмы с приобре­тением специфических для тромбоцитов органелл и белков и 5) высвобождения тромбоцитов в циркуляторное русло.

Родоначальной клеткой, коммитированной исключитель­но по мегакариоцитарному ряду, является колониеобразую­щая единица мегакариоцита, способная проходить 1 -9 мито­зов до вступления в эндомитоз и образовывать колонии зре­лых мегакариоцитов.

Различают три стадии созревания мегакариоцитов. Первая стадия - мегакариобласты, составляющие не более 10% всей популяции; вторая, промежуточная стадия - про- мегакариоциты (около 15%); третья - зрелые мегакариоциты (75-85%). Они делятся на гранулярные и базофильные фор­мы, проходящие заключительный эндомитоз и тромбоцито- отделение. Синтез ДНК в этом ряду клеток происходит только в мегакариобласте - самой молодой морфологически рас­познаваемой клетке мегакариоцитарного ростка. Процесс преобразования мегакариобластов в мегакариоциты продол­жается около 25 часов. Время созревания мегакариоцита - 25 часов, а жизненный цикл мегакариоцитов составляет 10 суток.

У взрослого человека мегакариоциты - наиболее круп­ные клетки, их диаметр колеблется от 40 до 100 мкм. По со­держанию ДНК эти клетки являются уникальными: у 2/3 мегакариоцитов содержание ДНК в 8 раз превышает таковое в диплоидных клетках, например в лимфоцитах.

2.4. Тромбоцитопоэз

Своеобразие мегакариоцитарных клеток заключается в непрекращающейся цитоплазматической дифференцировке, которая заканчивается тромбоцитообразованием. Каждый мегакариоцит в зависимости от его величины (плоидности) образует от 2000 до 8000 тромбоцитов. Содержание мегакариоцитов в костномозговом пунктате из грудины у здоровых лиц подвержено небольшим колебаниям и состав­ляете"! ,8-216,2 в1 мкл, надолю зрелых мегакариоцитов при­ходится 76%. Образование клеток-предшественников мега- кариоцитопоэза осуществляется по общему для всех грану­лярных клеток принципу: избыток тромбоцитов в циркулиру­ющей крови в норме тормозит тромбоцитопоэз, а тромбоци- топения его стимулирует. Гуморальная регуляция тромбоци- топоэза происходит с участием тромбопоэтина, а также ИЛ-3, ИЛ-6, ИЛ-11. Наиболее быстрый путь увеличения количества тромбоцитов - ускоренное созревание мегакариоцитов и тромбоцитообразование, связанное со способностью ядра мегакариоцита к заключительному эндомитозу. Созревание мегакариоцитов имеет свои закономерности, которые моди­фицируются в экстремальных условиях: ускоряются при усилении нормальной регенерации (при кровопотере), за­медляются под воздействием внешних и внутренних факто­ров (химиотерапевтических препаратов, дефицита витаминов и пищевых ингредиентов, антитромбоцитарных антител). Митотический индекс мегакариоцитов не превышает 0,5%.

В цитоплазме зрелых мегакариоцитов всегда содержатся морфологически зрелые тромбоциты, по количеству и состо­янию органелл не отличающиеся от периферических тромбо­цитов. Единственным отличием является отсутствие широко­го рыхлого слоя наружной мембраны, гликокаликса, что де­лает тромбоциты, находящиеся в цитоплазме мегакариоцита, морфологически не сформированными. В образовании этого наружного слоя, необходимого для обособления тромбоци­тов, играет роль заключительный эндомитоз, во время кото­рого образуется поверхностная система микротрубочек и гликокапикс тромбоцитов.

Нормальные тромбоциты представляют собой сферичес­кие структуры диаметром от 1 до 5 мкм. Гиаломер тромбо­
цитов ограничен трехслойной мембраной, на которой адсор­бируются факторы свертывающей системы. Она играет боль­шую роль в процессах адгезии и агрегации тромбоцитов. Внутри тромбоцитов имеется множество гранул различной структуры, формы и величины, в которых содержатся фосфо­липиды, АТФ, серотонин, ферменты, фибронектин, гистамин, катионные белки, фактор, активирующий фибробласты, трансформирующий ростовой фактор.

Популяция тромбоци­тов неоднородна. Среди данной популяции различают зрелые тромбоциты (87,0 ± 0,19%), юные (незрелые) (3,2 ± 0,13%), старые (4,5 ± 0,21%) и формы раздражения (2,5 ± 0,1%). Вре­мя циркуляции тромбоцитов - 10-12 суток. Тромбоциты по сравнению с другими клетками периферической крови де­формируются меньше. Двигаясь с током крови, они почти не касаются стенок кровеносного русла. Тромбоциты при кон­такте с эритроцитами не прикрепляются к ним. При исполь­зовании изотопной метки установлено, что 2/3 тромбоцитов находится в циркуляторном русле, 1/3 - в селезенке или в других экстраваскулярных местах. В селезенке тромбоциты "прилипают" к поверхности эндотелиальных клеток, высти­лающих синусы, и кретикулоэндотелиальным клеткам красной пульпы. "Селезеночные" тромбоциты обычно обмениваются с циркулирующими тромбоцитами и мобилизуются после вве­дения эпинефрина. В селезенке обычно секвестрируется большой процент молодых больших тромбоцитов. Увеличе­ние числа тромбоцитов обычно бывает после тяжелой физи­ческой нагрузки. Нет точных данных о мобилизации тромбо­цитов из неселезеночного пула. В норме тромбоциты отсутст­вуют в лимфе и других жидкостях организма. В здоровом организме разрушение тромбоцитов соответствует их про­дукции, что составляет в сутки 35000 ± 4300 пластинок на 1 мкл крови. Поврежденные (старые) тромбоциты накапли­ваются и разрушаются в основном в селезенке.

Промегакариоцит.

По размеру в 1,5-2 раза больше мегакариобласта. Ги­гантское ядро, круглое, но с четкой тенденцией к сегменти­рованию. Ядерный хроматин преимущественно грубо-сет-

2.6. Тромбоцитопоэз

чатый, имеются ядрышки. Цитоплазма базофильная, с еди­ничными азурофильными гранулами.

Мегакариоцит.

Самая большая гемопоэтическая клетка костного мозга. Имеет характерное ядро, с резкими углублениями, может быть самой причудливой формы. Структура хроматина грубо­сетчатая, с утолщениями в узлах сетки. Цитоплазма окси- фильная, с нежными гранулами.

Во многих клетках видно отделение тромбоцитов от цитоплазмы.

Рис. 41. Тромбоцит.

Самая маленькая частица крови (1/4-1/5) размера эрит­роцита). Имеет светло-голубую цитоплазму (гиаломер) и внутреннюю зернистую часть фиолетового цвета - (грануло- мер).

В препарате тромбоциты обычно встречаются группами, что обусловлено их физиологической склонностью к агрега­ции.

Рис. 43. Основные характеристики тромбоцитарного ростка.

Клетки мегакариоцитопоэза - самые крупные клетки крови человека.

Тромбоциты - единственный тип клеток, являющийся исключительно продуктом созревания цитоплазмы.

Все клетки мегакариоцитопоэза обладают специфичес­кой способностью к агрегации с тромбоцитами, которые часто обнаруживаются прилежащими к краю цитоплазмы мате­ринской клетки.

Повышение числа тромбоцитов - тромбоцитоз - явля­ется ведущим симптомом первичной тромбоцитемии, что наблюдается при миелопролиферативных заболеваниях, а
также вторичной тромбоцитемии при хронических воспали­тельных процессах (ревматоидный артрит, туберкулез, сар- коидоз, колит и энтерит), острых инфекциях, гемолизе, ане­миях, злокачественных новообразованиях, после спленэкто­мии.

Снижение числа тромбоцитов - тромбоцитопения - от­мечается при угнетении мегакариоцитопоэза (острые и хро­нические лейкозы, аппастическая анемия, пароксизмальная ночная гемоглобинурия), нарушении продукции тромбоцитов (алкоголизм, мегалобластная анемия). Тромбоцитопения наблюдается при сппеномегалии (цирроз печени, болезнь Гоше), повышенной деструкции и/или утилизации тромбо­цитов (идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, пост- трансфузионная, лекарственная, неонатальная тромбоцито­пения, вторичная тромбоцитопения при лейкозах, лимфомах, системной красной волчанке). Повреждение тромбоцитов может быть индуцировано тромбином (диссеминированное внутрисосудистое свертывание крови, осложнения при ро­дах, сепсисе, черепно-мозговой травме). Тромбоцитопения наблюдается при массивных переливаниях крови и кровеза­менителей за счет гемодилюции. Нарушение функции тромбоцитов может быть обусловлено генетическими, либо внешними факторами. Генетические дефекты лежат в основе болезни Виллебранда и ряда редких синдромов, связанных с недостаточностью АДФ, нарушениями системы тромбоксана А2 или реакциями на него, изменением мембранных глико­липидов и другими молекулярными изменениями.

Дифференцировка и созревание клеток мегакариоцитопоэза происходит в костном мозге, где из коммитированных морфологически неидентифицируемых клеток-предшественников КОЕ-мгкц формируются колонии мегакариоцитарных клеточных элементов. При созревании клетки проходят три морфологически дифференцируемые стадии: мегакариобласт, не превышающий 10% всей популяции, промегакариоцит (около 15%) и мегакариоцит, на его долю приходится от 75 до 85%. Процесс преобразования мегакариобластов в мегакариоциты продолжается около 25 часов. Время созревания мегакариоцита составляет примерно 25 часов, а жизненный цикл его около 10 суток. Отличительной чертой клеточных элементов мегакариоцитопоэза является их способность к эндомитозу (полиплоидизации) делению ядра без разделения цитоплазмы, что приводит к появлению гигантского размера клеток (мегакариоцитов). В процессе мегакариоцитопоэза клетки проделывают от 3 до 6 эндомитозов, что соответствует плоидности мегакариоцита от 8 n до 64 n. Созревание мегакариоцитарных элементов сопровождается накоплением в цитоплазме гранул. Способность зрелых мегакариоцитов к эндоцитозу проявляется в явлении эмпириополезиса, суть которого заключается в захвате гемопоэтических клеток. Частота его возрастает при злокачественных новообразованиях.
В альфа-гранулах мегакариоцитов содержится значительное количество белков: фактор Виллебранда, тромбоцитарный фактор 4, тромбоспондин, фибриноген, фибронектин, тромбоцитарный ростовой фактор, трансформирующий ростовой фактор бета, тромбоцитарный ингибитор коллагеназы. Тромбоцитарная пероксидаза присутствует на всех стадиях созревания клеток мегакариоцитарной линии, включая тромбоциты.
Основная функция мегакариоцитопоэза – образование тромбоцитов, поддержание их количества в кровотоке на постоянном уровне. Мегакариоциты располагаются в костном мозге вблизи костномозговых синусов, цитоплазматические опоры через миграционные поры проникают в синусы костного мозга, где и происходи отшнуровка тромбоцитов. Основными регуляторами, стимулирующими мегакариоцитопоэз являются ИЛ-1, ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-11, фактор стволовых клеток, лейкоз-ингибирующий фактор, ГМ-КСФ, Г-КСФ, эритропоэтин, тромбопоэтин. К факторам, ингибирующим тромбоцитопоэз , относят тромбоцитарный фактор 4, трансформирующий фактор роста бета1-, альфа- и гамма-интерфероны и другие ингибиторы.
Тромбоцит — безъядерная клетка диаметром 2-4 мкм, средний объем 7,5 куб.мкм (от 3 до 10 куб.мкм). Популяция тромбоцитов неоднородна. Различают зрелые тромбоциты (87%), юные (незрелые — 3.2%), старые (4.5%), формы раздражения (2,5%). Микроформы тромбоцитов имеют диаметр менее 1.5 мкм, макроформы могут достигать 5 мкм и мегалоформы до 6-10 мкм. В центре зрелого тромбоцита содержится обильная азурофильная зернистость. Форма тромбоцитов — овальная, круглая, сферическая или дискоидная. Период созревания тромбоцитов в среднем составляет 8 дней, продолжительность пребывания в кровотоке от 9 до 11 днем. В тромбоците выделяют гель-зону и зону органелл. Гель-зона представляет собой матрикс цитоплазмы. В ней расположены микротрубочки, микрофиламенты и другие структуры, обеспечивающие образование псевдоподии, внутреннюю контракцию и секрецию. Зона органелл тромбоцитов состоит из беспорядочно расположенных по цитоплазме митохондрий, пероксисом (содержат каталазу) и гранул хранения. В тромбоцитах выделяют 3 вида органелл хранения: альфа-гранулы, электронно-плотные тельца (бета-гранулы) и лизосомы (гамма-гранулы). В альфа-гранулах хранится до 30 различных белков, большинство из которых синтезируются в мегакариоцитах: фибриноген, фактор Виллебранда, V-фактор, фактор роста тромбоцитов (PDGF), фактор 4 тромбоцитов бета-тромбоглобулин, тромбоспондин, фибронектин. Р-селектин, альфа-макроглобулин, альфа-антплазмин, альфа1-антитрипсин, протеин S, лейкоцитарный хемотаксический фактор, высокомолекулярный кининоген и другие. Участие белков альфа-гранул в физиологических и патологических процессах многостороннее:

• митогенный и хемотаксический эффект;
• адгезивное действие, участие в агрегации тромбоцитов;
• в плазменном гемостазе;
• вазоактивное действие;
• иммунные и другие эффекты.

В плотных тельцах (дельта-гранулы) хранятся субстанции, вызывающие прежде всего сосудистые реакции, адениловые нуклеотиды (АТФ, АДФ, АМФ, цАМФ, ГДФ), серотонин, адреналин, норадреналин, ДОФамин, гистамин и другие. Высвобождающиеся из пула хранения АТФ и АДФ быстро метаболизируются в плазме до АМФ и аденозина. АДФ является важнейшим физиологическим метаболитом, обеспечивающим первичный гемостаз.
В лизосомах (гамма-гранулы) находятся гидролитические ферменты пероксидаза, глюкозидазы, галактозидаза или бета-глицерофосфатаза. Лизосомы секретируют хранящийся в них секрет только при воздействии сильных стимуляторов, таких, как коллаген и тромбин, что сопровождается необратимыми изменениями тромбоцитов.
Тромбоциты способны секретировать содержимое гранул частично при обратимой адгезии и в процессе взаимодействия с капиллярной сетью сосудов и полностью при реакции освобождения, связанной с необратимой адгезией на поврежденной сосудистой стенке. После секреции наблюдается дегрануляция, большинство гранулярных мембран деградирует, гранулы практически не восстанавливаются и тромбоциты во многом теряют свою физиологическую активность.
Основные функции тромбоцитов : ангио-трофическая, адгезивно-агрегационная, сорбционно-транспортная, активация плазменного гемостаза, ретракция кровяного сгустка, фиксация и транспорт циркулирующих иммунных комплексов.

Гигантские клетки костного мозга – мегакариоциты – являются родоначальниками кровяных пластинок. Происхождение тромбоцитов из мегакариоцитов костного мозга убедительно демонстрируется наблюдениями, показавшими путем фазовоконтрастной микросъемки культивируемого эксплантата костного мозга весь процесс возникновения кровяных пластинок из гигантских клеток.

Роль гигантских клеток костного мозга как единственных продуцентов кровяных пластинок окончательно доказана электронномикроскопическими, цито- и иммунохимическими методами, методом меченых антител. Путем иммунофлюоресценции удалось доказать существование общих антигенов в мегакариоцитах и тромбоцитах. Как показали исследователи, иммунофлюоресцирующий гамма-глобулин, обладающий специфическими противопластиночными "противочеловеческими" свойствами, вступает с мегакариоцитами и тромбоцитами в реакцию антиген-антитело, что доказывается избирательной флюоресценцией "меченых" кровяных пластинок и гигантских клеток кровяного мозга.

Мегакариоциты развиваются из клетки предшественницы мегакариоцитов путем повторных эндомитозов, приводящих к колоссальной гипертрофии цитоплазмы и полиплоидизму ядра. Промежуточными формами развития гигантских клеток костного мозга являются мегакариобласты и промегакариоциты.

Мегакариобласт – клетка округлой формы, сравнительно небольших размеров, ближе всего стоящая к основной родоначальной клетке кровяных элементов. Она характеризуется довольно грубой структурой ядра. Ядро мегакариобласта, состоящее иногда из двух соприкасающихся бобовидных долек, интенсивно окрашено; в нем содержится несколько четко ограниченных нуклеол голубого цвета. Цитоплазма не содержит зернистости, базофильна; иногда от этой базофильной цитоплазмы отшнуровываются отростки, которые дают начало голубым пластинкам.

Следующим этапом развития является промегакариоцит. Эта форма обычно имеет значительно большие размеры, чем мегакариобласт, и отличается крупным, интенсивно окрашенным ядром с тенденцией к некоторому полиморфизму (бухтообразные вдавления, намечающиеся перетяжки и сегментации ядра). Структура ядра более грубая, чем в мегакариобластах; цитоплазма базофильна, зернистости не содержит или же содержит единичные азурофильные зернышки. В промегакариоцитах, так же как и в мегариобластах, наблюдается процесс клазматоза, т.е. отшнуровки цитоплазматических частичек, образующих так называемые голубые пластинки.

В дальнейшем промегакариоцит проделывает последовательные этапы развития, в течение которых ядро приобретает ещё более грубую структуру и становится полиморфным. Более или менее параллельно с развитием ядра протекает и дифференциация цитоплазмы: она постепенно теряет свою базофилию и приобретает красновато-сиреневую окраску вследствие появления обильной азурофильной зернистости, которой придают большое значение в образовании пластинок.

Мегакариоцит - клетка огромных размеров; в среднем её диаметр равен 50-60 мкм, а в некоторых случаях, например при полицитемиях, достигает 80-100 мкм. Ядро мегакариоцита характеризуется крупной величиной; оно полиплоидно и полиморфно, иногда полисегментировано, принимая причудливые формы - корзинки, цепочки, оленьих рогов и т.п. Развитие ядра завершается его фрагментацией и инволюцией через пикноз, рарефикацию и кариорексис.

Ядерно-цитоплазменное соотношение в мегакариоцитах обычно в пользу цитоплазмы: последняя, занимает нередко все поле зрения микроскопа. Исключение представляют собой гигантские клетки, утратившие большую часть цитоплазмы в процессе образования пластинок. Вообще на препаратах стернального пунктата наряду с целыми, хорошо сохранившимися клетками встречаются разорванные в клочья клетки, отдельные ядра или их фрагменты.

Общее количество мегакариоцитов костного мозга человека исчисляется в 130-190 млн. Цикл функционирования мегакариоцита, т.е. количество дней, в течение которых мегакариоцит отшнуровывает кровяные пластинки, составляет в среднем 8 суток.

В нормальных мегакариоцитах можно видеть все последовательные стадии образования пластинок, начиная с накопления азурофильной зернистости в виде кучек по периферии цитоплазмы и кончая процессом отшнуровывания и отделения пластинок.

Впервые Wright (1906) было показано на костном мозгу котят, что образование кровяных пластинок происходит путем отрыва (отшнуровывания) отдельных частичек из псевдоподий мегакариоцитов, проникающих в капилляры костного мозга.

В физиологических условиях процесс отшнуровки пластинок наблюдается в 40-60% всех мегакариоцитов костного мозга. Новообразованные пластинки образуют как бы "жемчужные цепочки", или "хвосты", отходящие от мегакариоцитов. Процесс образования пластинок больше всего выражен в мегакариоцитах с полиморфным ядром или полинуклеарных мегакариоцитах, что указывает на интимное участие клеточного ядра в этом процессе.

Процесс пластинообразования продолжается до тех пор, пока вся цитоплазма мегакариоцита не окажется "разменянной" на пластинки. Подсчитано, что из одного мегакариоцита получается в среднем около 4 тыс кровяных пластинок. При этом сама гигантская клетка превращается в метамегакариоцит – форму, характеризующуюся крупным ядром, окруженным узким цитоплазматическим венчиком, состоящим из новообразованных пластинок. Дальнейшее, по существу инволютивная, фаза развития гигантской клетки заключается в её распаде на отдельные ядерные фрагменты, в некоторых случаях (при лейкозах) появляющиеся в периферической крови.

Для клиники особый интерес представляет взаимосвязь между мегакариоцитами костного мозга и кровяными пластинками периферической крови. Гиперплазия гигантоклеточного аппарата, наблюдаемая в наибольшей степени при полицитемии и так называемой геморрагической тромбоцитемии, характеризуется преобладанием зрелых полиморфноядерных и зернистых форм мегакариоцитов, отличающихся особенно большими размерами (до 100 мкм и более) и весьма деятельных в функциональном отношении, и сопровождается выраженным гипертромбоцитозом в периферической крови.

Увеличенное содержание в костном мозгу мегакариоцитов наблюдается и при хронической форме миелолейкоза и особенно при остеомиелосклерозе. Однако и здесь параллельно с нарушением созревания миелоидных клеток нарушается процесс созревания гигантских клеток: среди последних преобладают юные формы – мегакариобласты и промегакариоциты; одновременно наблюдается повышенное образование пластинок в зрелых мегакариоцитах.

Реактивная гиперплазия костного мозга в целом, сопровождающаяся повышенным образованием пластинок мегакариоцитами, отмечается также при постгеморрагических анемиях.

Количество мегакариоцитов всех типов уменьшено при гипопластических и апластических состояниях костного мозга.

При пернициозной анемии, спру и других В 12 (фолиево) - дефицитных состояниях наблюдается сдвиг мегакариоцитов вправо, аналогичный нейтрофильному сдвигу вправо и выражающейся в том, что часть гигантских клеток содержит необычайно полиморфное ядро. Встречаются и двуядерные мегакариоциты; при этом, несмотря на наличие зрелой азурофильной зернистости, мегакариоциты малоактивны; процессы образования пластинок в них замедлены, результатом чего является присущая этим заболеваниям тромбоцитопения.

Тромбоциты, или кровяные пластинки, называемые также бляшками Биццоцеро (в честь детально описавшего их в 1882 г. итальянского ученого Bizzozero),представляют собой наряду с эритро- и лейкоцитами третий форменный элемент крови.

Кровяные пластинки под разными названиями: "globulins" (Donne), "Elementarblaschen" (Zimmerman) – были известны уже с 40-х годов ХIХ века, однако самостоятельность этих элементов и их важная роль в процессах гемостаза и свертывания крови были установлены лишь в 80-х годах после работ Hayem (1878), М.Лавдовского (1883) и др. В отличие от белых и красных кровяных телец, представляющих собой живые (лейкоциты) или лишенные ядер (эритроциты) клетки, кровяные пластинки представляют собой лишь цитоплазматические осколки гигантских клеток костного мозга - мегакариоцитов. По этой причине название "тромбоцит" (от греческого слова "cytos"-клетка) по отношению к кровяным пластинкам человека не совсем правильно. Истинные тромбоциты, представляющиеся ядерными клетками, имеются только у низших позвоночных, в частности у лягушки, - так называемые веретенообразные клетки Реклингаузена.

В нормальных условиях количество кровяных пластинок колеблется между 200-400·10 9 /л. Общее число кровяных пластинок у человека составляет примерно 1,5 триллиона. Вся масса тромбоцитов человеческого организма составляет около 20 мл (две десертные ложки).

Клетки мегакариоцитопоэза являются самыми крупными клетками крови человека. - единственный тип клеток, который является исключительно продуктом созревания цитоплазмы.

Коммитированной родоночальной клеткой мегакариоцитарного ряда является колониеобразующая единица мегакариоцита, проходящая 1-9 митозов до вступления в эндомитоз и образования колонии зрелых мегакариоцитов.

Существуют 3 стадии созревания мегакариоцитов:

1. Мегакариобласты, составляющие до 10% всей популяции;
2. Промегакариоциты - около 15%;
3. Зрелые мегакариоциты - 75..85%.

Время созревания мегакариоцита составляет 25 часов, жизненный цикл - 10 суток.

Мегакариоциты взрослого человека - самые крупные (диаметр 40..100 мкм). Каждый мегакариоцит в зависимости от его размеров образует 2000..8000 тромбоцитов. Созревание мегакариоцитов имеет свои закономерности: ускоряется при кровопотере; замедляется под воздействием внешних и внутренних факторов.

Нормальные тромбоциты - сферические структуры размером 1..5 мкм. Внутри тромбоцитов имеется множество гранул различной структуры, формы и величины, в которых содержатся фосфолипиды, серотонин, фибронектин, гистамин, ферменты, АТФ, активирующий фибробласты фактор, катионные белки, трансформирующий ростовой фактор. Популяции тромбоцитов неоднородны, и содержат:

• зрелые тромбоциты - 8±0,19%;
• юные - 3,2±0,13%;
• старые - 4,5±0,21%;
• формы раздражения - 2,5±0,1%.

Время циркуляции тромбоцитов 10..12 суток. Установлено, что две трети тромбоцитов находится в циркуляторном русле, одна треть - в селезенке или других депо. Двигаясь с током крови, тромбоциты практически не касаются стенок кровеносного русла, а при контакте с эритроцитами не прикрепляются к ним. Увеличение количества тромбоцитов обычно бывает после тяжелой физической нагрузки. В норме тромбоциты отсутствуют в лимфе и других жидкостях организма. Старые тромбоциты накапливаются и разрушаются в основном в селезенке в количестве, равном продуцированию новых тромбоцитов - 35000±4300 пластинок в 1 мкл крови.

Промегакариоцит - по размеру в 1,5-2 раза больше мегакариобласта, с круглым ядром гигантского размера, с четкой тенденцией к сегментированию. Хроматин грубо-сетчатый, имеются ядрышки. Цитоплазма базофильная, с единичными азурофильными гранулами.

Самая большая гемопоэтическая клетка костного мозга, с характерным ядром часто причудливой формы, с резкими углублениями. Хроматин грубо-сетчатый, с утолщениями в узлах сетки. Цитоплазма оксифильная, с гранулами.

Самая маленькая клетка крови (20-25% размера эритроцита) с светло-голубой цитоплазмой и внутренней зернистой частью фиолетового цвета. В препарате тромбоциты как правило находятся группами, что обусловлено их физиологической склонностью к агрегации.

Причины тромбоцитоза (повышенного числа тромбоцитов), являющегося ведущим симптомом первичной и вторичной тромбоцитемии:

• миелопролиферативные заболевания;
• хронические воспалительные процессы: туберкулез, ревматоидный артрит, саркоидоз, колит, энтерит;
• острые инфекции;
• гемолиз;
• анемии;
• злокачественные опухоли;
• после спленэктомии.

Причины тромбоцитопении (сниженного числа тромбоцитов):

• угнетение мегакариоцитопоэза: лейкозы, апластическая анемия;
• нарушение продукции тромбоцитов: мегалобластная анемия, алкоголизм;
• повышенная деструкция и разрушение тромбоцитов;
• массивные переливания крови;
• нарушение функции тромбоцитов может быть обусловлено генетическими (болезнь Виллебранда), или внешними факторами.

ВНИМАНИЕ! Информация, представленная сайте сайт носит справочный характер. Администрация сайта не несет ответственности за возможные негативные последствия в случае приема каких-либо лекарств или процедур без назначения врача!